海南医学院机构知识库

生物化学与分子生物学（ 56 ）

学科带头人：蔡望伟

学科类型：省级重点（培养）学科（2012年获批）

简介：生物化学与分子生物学既是生命科学的基础，又是生命科学的前沿。生物化学与分子生物学在分子水平探讨生命的本质，即研究生物体的分子结构与功能、物质代谢与调节。生物化学与分子生物学是目前自然科学中进展最迅速、最具活力的前沿领域。

中文期刊（55）

气体信号分子硫化氢对蚕豆诱导氧化应激小鼠的影响作者：彭磊，杜冠魁，罗学明，钟国柄，兰永发，孙嘉仪，蔡望伟，肖曼（海南医学院；海南医学院生物化学与分子生物学教研室）出处：临床误诊误治2016P 关键词：硫化氢硫氧化物类氧化还原蚕豆 C3He小鼠摘要：目的探讨气体信号分子硫化氢（H2S）与小鼠体内氧化应激的关系。方法取C3He小鼠24只随机均分空白组（不含蚕豆成分的正常饲料喂养）、蚕豆组（每4 h灌胃1次10 g/kg蚕豆处理饲料）、H2S组（每4 h灌胃1次10 g/kg蚕豆处理饲料加4 h腹腔注射25μm/kg硫氢化钠）。24 h后,测定各组小鼠血浆中过氧化氢（H2O2）、H2S、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）含量及过氧化氢酶（CAT）活性,以及超氧化物歧化酶1（SOD1）、超氧化物歧化酶2（SOD2）、CAT及谷胱甘肽还原酶（GSR）等抗氧化基因的表达。结果饲养24 h后,与空白组相比,蚕豆组H2O2、MDA、H2S含量显著升高,CAT活性显著下降,差异均有统计学意义（P均<0.05）。与蚕豆组相比,H2S组H2O2、MDA含量显著下降,H2S、GSH显著升高,CAT活性显著下降,差异均有统计学意义（P均<0.05）。饲养24 h后,与空白组相比,蚕豆组谷胱甘肽过氧物酶3（GPX3）、硫氧还蛋白过氧化物酶3、含铜超氧化物歧化酶（Cu SOD）和肿瘤坏死因子-α基因表达显著增加（P均<0.05）。与蚕豆组相比,H2S组SOD1、SOD2、CAT、谷胱甘肽过氧物酶1、GPX3、GSR、Cu SOD、转化生长因子β1基因表达量显著增加（P均<0.05）。结论 H2S可以通过调控小鼠氧化应激相关基因的表达,抑制蚕豆诱导小鼠的氧化应激状态。
受体介导甲胎蛋白对NIH3T3细胞增殖的促进作用作者：李孟森，李平风，贺师鹏，杜国光，李刚（海南医学院生物化学教研室　　海口；北京大学医学部生物化学与分子生物学系；北京大学医学部生物物理系；北京大学医学部生物化学与分子生物学系）（海南医学院生物化学教研室　　海口；北京大学医学部生物化学与分子生物学系；北京大学医学部生物物理系；北京大学医学部生物化学与分子生物学系）出处：海南医学院学报2003P 关键词：甲胎蛋白类 3T3细胞 AFP受体细胞增殖信号传递基因表达调控摘要：目的:探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促新生细胞增殖作用的分子机理。方法:从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的NIH3T3细胞;用3H-TdR参入法观察AFP对细胞DNA合成的影响以及放射受体分析法分析NIH3T3细胞膜表面AFP受体分布;观察在AFP作用下细胞内的第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)浓度及依赖cAMP激活的蛋白激酶A(PKA)活性的改变;Westernblot分析AFP对增殖相关的P21ras表达的影响。结果:10～80mg/L的AFP对NIH3T3细胞的DNA合成有明显的促进作用,与对照组比较最大增幅为121.9%;在NIH3T3细胞膜表面存在2种不同解离平衡常数(KD)的AFP受体,KD1=2.722nmol/L(12810位点/细胞);KD2=89.305nmol/L(119700位点/细胞);AFP能显著提高NIH3T3细胞内的cAMP浓度及PKA活性;对P21ras的表达也有明显的促进作用。结论:AFP促NIH3T3细胞增殖是通过细胞膜表面受体介导,经跨膜cAMP-PKA信号转导途径,影响基因表达来实现的。
甲胎蛋白新功能：调节HeLa细胞生长的信号转导机制作者：李孟森，李平风，贺师鹏，杜国光，李刚（海南医学院生物化学教研室　　海口；北京大学医学部生物化学与分子生物学系；北京大学医学部生物物理学系；北京大学医学部生物化学与分子生物学系）（海南医学院生物化学教研室　　海口；北京大学医学部生物化学与分子生物学系；北京大学医学部生物物理学系；北京大学医学部生物化学与分子生物学系）出处：海南医学院学报2003P 关键词：甲胎蛋白类 HeLa细胞 AFP受体细胞增殖信号传递摘要：目的:观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)调节HeLa细胞生长的细胞内信号转导机制。方法:用从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的HeLa细胞,通过MTT计数、3H-TdR参入法、流式细胞仪等研究细胞增殖;放射免疫结合法检测在AFP作用下,HeLa细胞第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)活性的改变;用共聚焦显微镜观测细胞内Ca2+浓度的变化;用Westernblotting分析法分析P21ras表达。结果:①表明AFP(浓度大于10mg/L)对HeLa细胞增殖有明显的促进作用。②在AFP(20mg/L)作用下,PKA活性升高达122.6%,而Ca2+浓度升高达125.71%;P21ras蛋白表达在作用24h时增高112.6%。③抗甲胎蛋白单克隆抗体能有效地阻断AFP对HeLa细胞信号转导的影响。结论:①AFP能促HeLa细胞生长;②AFP可能通过cAMP-PKA和Ca2+途径调节HeLa细胞生长。
紧密连接蛋白claudin-10基因5''调控区序列的生物信息学分析作者：周雯，王青松（海南医学院组织胚胎学教研室；海南医学院生物化学与分子生物学教研室）出处：海南医学院学报P 关键词：紧密连接蛋白 claudin 10 5''调控区生物信息学摘要：目的:拟对claudin灢10基因转录起始位点和启动子区域进行预测,并对潜在的转录因子结合位点进行分析。方法: 利用BLAST 比对分析TATA灢box、GC灢box和CAAT灢box;利用在线分析软件NeuralNetworkPromoterPrediction、PROMOTERSCAN 和PROMOTER2.0分析claudin灢10基因5曚调控区序列中启动子;利用在线分析软件EMBOSS和CpGIslandSearcher分析claudin灢10基因5曚调控区序列中CpG岛位置;利用在线分析软件TFSEARCH 分析claudin灢10基因5曚调控区序列中潜在的转录因子结合位点。结果:claudin灢10基因5曚调控区序列中存在1个CAAT灢box和3个GC灢box,没有TATA灢box;claudin灢10基因可能存在4个启动子位点;CpG 岛为444bp区间（17002143bp）或834bp区间（13672200bp）;评分在85分以上时,该区域具有159个潜在的转录因子结合位点;评分在90分以上时,该区域具有48个潜在的转录因子结合位点;评分在95分以上时,该区域具有9个潜在的转录因子结合位点。结论:通过生物信息学的方法对于claudin灢10基因转录起始位点、启动子区域和潜在的转录因子结合位点进行预测,对于科研具有十分重要的指导意义,但最终的结论还需要实验来证实
甲胎蛋白对人肝癌Bel7402 细胞 Ca2+浓度的影响作者：李孟森，李平风，李刚，杜国光（海南医学院生化学教研室；北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系；北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系　　海口）（海南医学院生化学教研室；北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系；北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系　　海口）出处：海南医学院学报2001P 关键词：甲胎蛋白类钙离子信号传递肝肿瘤癌摘要：目的:研究甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响.方法:采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化.结果:在AFP作用4 min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10 min时降到正常水平.结论:AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Be17402细胞内信息传递.
任务驱动教学法在生物化学与分子生物学实验教学中的应用作者：李崇奇（海南医学院生物化学与分子生物学教研室）出处：基础医学教育2016P 关键词：生物化学与分子生物学实验教学任务驱动型教学摘要：为了提高学生创新能力和解决目前实验教学中存在的问题,在生物化学与分子生物学实验教学中引入了任务驱动型教学法。教学任务设计时要能够激发学生学习兴趣,学生分析教学任务后能提出实验方案,完成教学任务时既要发挥教师的指导作用,又要鼓励学生独立完成操作;同时教师要充分发挥教学评价的导向作用,鼓励学生独立思考并提出自己独特的实验方案和解决方法。应用任务驱动型教学法,充分调动了学生的主观能动性,提高了解决问题的能力,为未来从事临床医学研究工作奠定了良好的基础。
甲状旁腺素,胰岛素样生长因子—1可加速成骨样细胞ROS17／2.8增殖周 … 作者：白秀英，李刚（北京医科大学生物化学与分子生物学系；海南医学院蛋白质核酸研究室）出处：细胞生物学杂志1999P 关键词：甲状旁腺素 IGF 1 成骨细胞增殖周期
人claudin-10基因启动子转录调控的初步分析作者：周雯，王青松（海南医学院组织胚胎学教研室；海南医学院生物化学与分子生物学教研室）出处：生物技术2015P 关键词： claudin 10基因启动子 LO2细胞转录调控荧光素酶报告基因摘要：[目的]构建不同长度的人claudin-10基因上游启动子荧光素酶报告基因载体,并在LO2细胞中比较其活性。[方法]以人LO2肝细胞基因组DNA为模板,PCR扩增获得claudin-10基因5’侧翼序列,并将其插入p MD18-T载体;PCR扩增获得不同长度的claudin-10基因上游启动子区序列,构建p GL3-Basic系列荧光素酶基因报告载体。瞬时转染LO2细胞,双荧光素酶报告基因分析系统检测转录活性。[结果]成功构建6个不同长度的人claudin-10基因上游启动子区(-1 451/+100bp、-1 022/+100bp、-1 005/+100bp、-677/+100bp、-377/+100bp和-108/+100bp)的报告载体;启动子活性实验结果表明:当claudin-10启动子片段从-1 005 bp截短至-677 bp,从-108 bp截短至+100 bp时活性显著下降(P0.05)。[结论]claudin-10启动子-1 005bp~-677bp和-108bp~+100bp区是claudin-10基因的主要转录调控区。
唾液淀粉酶活性影响因素教学实验改进探讨作者：李崇奇，蔡望伟（海南医学院生物化学与分子生物学教研室）（海南医学院生物化学与分子生物学教研室）出处：海南医学2014P 关键词：唾液淀粉酶酶活实验教学摘要：唾液淀粉酶活性影响因素的探讨是现行大中专院校生物化学实验中的常见项目。然而由于不同人群中唾液淀粉酶的活性相差较大,从而导致酶量很难控制。此外现行实验教材中该实验设计粗放,导致实验结果与现行生物化学理论不一致。因而本文从酶含量的确定、温度、pH值、激活剂与抑制剂几个方面,对该实验设计提出建议。
基于EST和GSS序列的巨桉miRNA研究作者：李崇奇，沈文涛，言普，黎小瑛，周鹏（海南大学农学院；中国热带农业科学院热带生物技术研究所,分析测试中心；海南医学院生物化学与分子生物学教研室）（海南大学农学院；中国热带农业科学院热带生物技术研究所,分析测试中心；海南医学院生物化学与分子生物学教研室）出处：热带作物学报2014P 关键词：巨桉 miRNA EST GSS 摘要：应用miRtour在线分析工具对巨桉的EST序列和GSS序列进行分析,预测巨桉的miRNA序列,应用psrobot预测miRNA的靶基因。结果发现205条miRNA前体序列和属于62个不同家族的170条成熟的miRNA序列,最大的miRNA家族为miR399家族,有17个成员;miRNA 5′段碱基存在明显的碱基偏倚,尿嘧啶出现频率高达40.6%;147个miRNA预测到了靶基因,共计预测到巨桉蛋白基因中有967个受到miRNA的调节,同时发现1个miRNA可以调控多个靶基因,同一蛋白质受多个miRNA调控的现象。

中文会议论文（1）

甲胎蛋白是肝癌细胞耐受全反式维甲酸诱导凋亡的新靶分子作者：朱明月，李孟森，谢协驹，李刚（海南医学院分子生物学重点实验室；海南医学院肿瘤研究所；海南医学院病理生理学教研室；北京大学医学部生物化学与分子生物学系）出处：2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议2011 关键词：甲胎蛋白 PTEN 肝癌细胞 PI3K/AKT信号通路摘要：目的:研究甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)对肝癌细胞内PTEN/AKT信息通路信号传递的影响。方法:用Western Blotting法分析全反式维甲酸(All trans retinoic acid,ATRA)处理人肝癌Bel 7402细胞24小时后PTEN表达的变化;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与PTEN相互作用;激光共聚焦显微镜观察AFP与PTEN的细胞